Jeno sinh ngày 23 tháng 4 năm 2000, tại Incheon, Hàn Quốc. Cái tên Lee Je-no là do ông ngoại đặt cho anh. Chữ "Đế" trong "Hoàng đế" còn "Nỗ" trong Nỗ lực". Jeno có một chị gái lớn hơn 2 tuổi. Dù bị dị ứng với lông mèo nhưng anh vẫn nhận nuôi ba con mèo hoang: Bongshik, Seol và Nal.

Jeno từng học ở trường trung học Hyunsan ở Ilsan, Goyang, Gyeonggi, Hàn Quốc. Tháng 3 năm 2016, Jeno theo học tại Trường Trung học Biểu diễn Nghệ thuật Seoul, nhưng đến đầu năm 2017 thì thôi học và chuyển sang học gia sư tại nhà để tập trung vào sự nghiệp. Tháng 8 năm 2018, Jeno vượt qua kì thi GED (General Education Development: Chứng chỉ Phát triển Giáo dục Trung học) - tương đương với bằng tốt nghiệp Trung học.

Jeno từng là người mẫu nhí và đã đóng nhiều quảng cáo khác nhau từ khi còn nhỏ. Jeno có thể chơi guitar và violin.